TINCIONES_BACTERIANAS

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TINCIONES BACTERIANAS ¡Por favor que quede bien gramnegativa señor Gram! Te recomiendo safranina para darle un buen tono http://www.slideboom.com/presentations/86145/TINCIONES_BACTERIANAS

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Porque se colorean las bacterias? Visualizarlas mejor Aumentando el contraste entre la bacteria y el medio que las rodea Detalles morfológicos Aumentan un poco su tamaño

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Que es un colorante? Compuestos orgánicos (la mayoría) Poseen afinidad específica por los materiales celulares. Según su naturaleza se unen a diferentes componentes celulares Cationicos (+) Comp (-): Ac nuc y polisacáridos ácidos. Aniónicos (-) comp (+): proteínas Azul de metileno Cristal violeta safranina Eosina Fucsina ácida Rojo congo

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CLASIFICACION DE LAS TINCIONES Simples: 1 solo colorante Todo se tiñe igual Ejemplos: Tinta china (-), Azul Metileno de Loeffler, Azul de lactofenol. Diferenciales: Más de 1 colorante Las estructuras celulares se diferencian en función de los diferentes colorantes. Ejemplos: Gram y Ziehl-Neelsen

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PRECOLORACION Fijación Coagulación del plasma Calor Sustancias qcas (formaldehido, ácidos y alcoholes) Mordiente Sustancias que se combinan con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora después de esto el colorante podrá fijarse al constituyente. Ejemplo: Acido tánico, lugol.

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COLORACION DE GRAM Hans Christian Gram 1884 Descubrimiento accidental Biopsia de tejido pulmonar Algunas bacterias retenían el colorante después del lavado y otras no Grampositivas Gramnegativas I

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¿QUE SE NECESITA? Colorantes Cristal Violeta Lugol Alcohol-Cetona. Safranina.  Otros                  Charola de tinción. Asa bacteriológica. Frasco lavador. Lámina portaobjetos  Muestra bacteriana Sólida (agar) Líquida (caldo) Especímen clínico.   I

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¿COMO SE HACE? 1. Extensión I

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¿COMO SE HACE? 2. Coloración 2.1 Violeta de Genciana 1 min I

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¿COMO SE HACE? 2. Coloración 2.2 Lugol de Gram 1 min I

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¿COMO SE HACE? 2. Coloración 2.3 Alcohol Acetona (Decoloración) (Etanol al 75 % y acetona al 95 %) 15 - 30 seg I

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¿COMO SE HACE? 2. Coloración 2.4 Safranina 30 seg I

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¿COMO SE HACE? 3. Secado I

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¿COMO SE HACE? 4. Observación 4.1 Aplicar aceite de inmersión I

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¿COMO SE HACE? 4. Observación 4.2 M.O con objetivo de 100x Gramnegativas Grampositivas I

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COLORACION DE GRAM Violeta Violeta Claro Safranina II-P1

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COLORACION DE ZIELH NEELSEN Franz Ziehl (bacteriólogo) y Friedrich Neelsen (patólogo). Tinción diferencial Fundamento: Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de C) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido

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VARIANTES Clásica En caliente Para Micobacterias Variante de Kinyoun En frío Para Actinomyces y Nocardia

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TECNICA Realizar frotis Fijar Fucsina-fenicada 5 minutos Emisión de vapores (no hierva) Lavar Decolorar con alcohol-ácido (2 min o hasta decolración total) Lavar Aplicar azul de metileno (1 minuto). Lavar

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CONSULTA Tinción negativa Tinción para esporas Tinción de Loeffler Rojo Congo

Summary: Algunas tinciones usadas en bacteriología

Tags: tinciones bacterias gram

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